一.黃曲霉B1快速檢測試劑盒原理及用途
黃曲霉B1快速檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的黃曲霉B1,試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的黃曲霉B1和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗黃曲霉B1抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含黃曲霉B1含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中黃曲霉B1的殘留量。
二.技術指標及組成
試劑盒靈敏度:0.03ppb(ng/ml)
反應模式:25℃,30min~15min
酶標板、標準品、高標準品、酶標記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復溶液
三.【*優勢】
1、產品種類齊全、質量可靠、*、靈敏度高、效果穩定、易保存、操作簡便
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四.需要的器材
儀器:酶標儀、打印機、均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
五.樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。
配液:
配液1:0.1M HCl 溶液 取0.86ml濃HCl加去離子水至100ml。
配液2:0.1M NaOH 溶液 稱取0.4g NaOH加去離子水至100ml。
配液3:乙腈-0.1M HCl 溶液 V乙腈:V0.1M HCl =84:16。
配液4:復溶液
將10×復溶液用去離子水10倍稀釋,用于樣本的復溶,復溶液在4℃環境可保存一個月。
六.操作流程
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
編 號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
加樣反應:加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應30分鐘。
洗 滌:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應。
測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應在終止反應后10分鐘內完成。
七. 結果分析
百分吸光率的計算
標準液或樣本的百分吸光率等于標準液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個標準液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即
百分吸光度值(%)= | A | ×100% |
A0 |
A—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標準溶液的平均吸光度值
標準曲線的繪制與計算
以標準液百分吸光率為縱坐標,對應的標準液濃度(ppb)的對數為橫坐標,繪制標準液的半對數曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中待測物的實際濃度。
若利用試劑盒專業分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析。(索?。?/span>
八.特別說明
由于不同指標檢測的樣本是不同的,處理方式也是不盡相同,如需了解更多,更詳細的技術參數可我司客服專員,歡迎廣大社會各界朋友前來咨詢和了解。臻科生物本著客戶至上的原則為客戶提供高質量高品質的產品,公司承諾如有任何質量的問題免費包退換(非人為因素造成的)。歡迎。